1.3 本文所要解决的问题
本课题是在温室条件下研究不同温度对花生幼苗叶片渗透调节物质的 影响,通过测定花生幼苗叶片可溶性糖(SS)、可溶性蛋白(SP)和游离脯氨 酸(Pro)以及丙二醛(MDA)的含量,从而发现花生幼苗在不同温度下,其渗 透调节物质的差异,找出对高温条件反应敏感的渗透调节物质,继而发现花生抗 高温的生理调节指标。
2 材料与方法
2.1 试验材料、材料处理和仪器设备
2.1.1 试验材料 供试花生(Arachishypogaea L.)种子:“海花一号”
(在附近的文沃市场种子专卖处买的)。首先选取大小,饱满程度一致,无病虫 的花生种子,将选好的花生种子包裹于浸润脱脂棉纱中萌发,另外准备 32 只一 次性杯子,每两个叠套在一起,其中里面的杯子杯底用针设置两到三个小孔(便 于换水),32h 后,将种子播种于每组放有适量均等的石英砂的杯子中(每组杯 子中播种 4 颗种子)。文献综述
2.2.2 材料处理 温室培养,给予花生种子正常的光照与水分,待每棵
花生幼苗长齐四片新叶,对花生幼苗分别进行 32℃、36℃、40℃的高温胁迫, 依旧每天给予幼苗充足的水分,光照为实验室人工气候箱自带荧光光照,然后分 别在第 0d、3d、6d、9d 测定 SS、SP、Pro 和 MDA 的含量,上述试验均以室温 26℃作为空白对照。
2.2.3 仪器设备 试管 烧杯 量筒 玻璃棒 容量瓶 棕色瓶 移液 管 研钵 称量天平 高速离心机 恒温水浴锅 紫外分光光度计 人工气候 箱
2.2 方法
测定可溶性糖的含量时,采用蒽酮比色法[8];用考马斯亮蓝 G--250 染色 法[8]来测量可溶性蛋白质的含量;测定游离脯氨酸含量时,使用的是酸性茚三酮 法[8];丙二醛(MDA)含量的测量一般运用硫代巴比妥酸显色法[8](2002)。
2.3 数据整理与分析
试验所得数据采用 Excel 进行整理归纳。
3 结果与分析
3.1 高温胁迫与花生幼苗叶片可溶性糖含量
植物在对抗逆境时,可溶性糖(SS)是一种有效的渗透调节保护剂。由图 1 可知,随着温度的升高,花生幼苗叶片的可溶性糖含量显著增加,且在对花生 幼苗进行 40℃高温处理时,与其它温度的热害处理相比,可溶性糖含量明显领 先,并表现出随着胁迫时间的延长而持续增加的趋势。在对花生幼苗叶片进行 32℃高温胁迫时,虽然胁迫时间在延长,然而可溶性糖含量的增加较缓慢,且上 升的幅度不大。花生幼苗叶片在被 40℃高温处理时,从第 3d 后,可溶性糖的含 量增加的趋势几乎是接近线性变化。热害处理第 9d 时,32℃、36℃、40℃胁迫 下的可溶性糖含量分别是第 0d 含量的 3.11、6.79、8.75 倍。在涂三思[9]、秦天 才就高温胁迫对黄姜叶片可溶性糖含量的影响的研究中,出现了相似的结果。来!自~751论-文|网www.751com.cn
3.2 高温胁迫与花生幼苗叶片可溶性蛋白含量
可溶性蛋白(SP)是很重要的渗透调节物质和营养物质。从图 2 可以看 出,温度升高,花生幼苗叶片的可溶性蛋白的含量在增加,并随着胁迫时间的延 长而明显增加。尤其,花生幼苗叶片在 40℃高温胁迫下,可溶性蛋白的含量要 明显地高于其它的高温处理。罗肖肖[10]在就高温逆境对黄金葛叶片中渗透调节物 质的积累的研究中,也很好地反映了类似的结果。