菜单
　　

    2  材料与方法

    2.1 植物材料

    徐紫薯3号的叶片。

    2.2 试剂

    液氮、95%乙醇、异丙醇、Regular Agarose G-10、75%乙醇、10mM NaAC、95%乙醇、PH8.0的TE溶液、酚、氯仿、1M Tris-HCl溶液、AP1 Primer（100 pmol/μl）、AP2 Primer（100 pmol/μl）、AP3 Primer（100 pmol/μl）、AP4 Primer（100 pmol/μl） 、Control Template（100 ng/μl）、 Control Specific Primer SP1（10 pmol/μl）、Control Specific Primer SP2（10 pmol/μl）、Control Specific Primer SP3（10 pmol/μl）、TaKaRa LA Taq （5 U/μl）、10×LA PCR Buffer II（Mg2+ plus）、dNTP Mixture（2.5 mM each）、2xCTAB溶液、6×Loading Buffer、dH2O、Buffer DE-A、Buffer DE-B、异戊醇、Buffer W1、Buffer W2、Eluent、去离子水、三氯甲烷:异戊醇=24:1、Gold View、GelStain（10000X）等。

    2.3 器材

    真空抽干机、DK-8D数显恒温水浴锅、KQ-250E型医用超声波清洗器、Eppendorf Centrifuge 5810R 离心机、电泳仪、全自动凝胶成像系统、BIO-RAD T100 Thermal Cyclear PCR仪、SW--CJ--IG型单人净化工作台、Nandrop2000核酸蛋白分析仪、LDZX-50KBS 立式高压蒸汽灭菌器等。来!自~751论-文|网www.751com.cn

    2.4 样品的准备

    将紫薯叶片用研钵磨成粗粉，每个2ml离心管内装入约半管的叶样粗粉以及一颗预先用95%乙醇处理消毒过的钢珠。同时将多功能球磨仪的两个适配器放入装有液氮的泡沫箱中预冷1分钟，填充好的离心管依次配平摆入预冷后的适配器内。适配器固定在对应位置后，检查卡槽是否对齐旋钮是否拧紧。打开电源，调整参数（频率改为25.4，时间改为1分钟）。第一次研磨结束后取一管检查研磨状态，若粉末粗细未达到要求，应适当延长研磨时间。将合格的粉末回收完毕后，把适配器装回原处，并将台面清理干净。在此过程中应注意离心管应配平放入适配器内，以及检查适配器是否卡紧，以防在球磨仪的震荡过程中因受力不均或适配器松动造成的机器故障。

    CTAB法提取叶片总DNA：植物中多糖含量较高，为有效去除多糖类杂质，常采用CTAB法抽提植物的基因组DNA[8,9]。苯酚能够使蛋白质变性，从而抑制脱氧核糖核酸么的降解[10]。氯仿又可以去除溶液中的微量酚。所以最后采用酚-氯仿抽提，能使得到的DNA更加纯净[11]。

  1. 上一篇：利拉鲁肽制备过程中C杂质的分析
  2. 下一篇：甜味抑制剂Lactisole对小鼠乳腺外植体mTOR信号通路的影响

  1. Tas1r1鲜味基因在脊椎类动物中的进化规律分析

  2. 番茄逆境响应基因SlERF26的...

  3. 黄牛线粒体16SrRNA基因特征...

  4. 几种农业级壳寡糖对甘薯...

  5. 植物表达载体的构建及转...

  6. GASBD基因在马铃薯中的表达...

  7. GASBD2基因在马铃薯中的表...

  8. 当代大学生慈善意识研究+文献综述

  9. 酸性水汽提装置总汽提塔设计+CAD图纸

  10. 中考体育项目与体育教学合理结合的研究

  11. 河岸冲刷和泥沙淤积的监测国内外研究现状

  12. java+mysql车辆管理系统的设计+源代码

  13. 乳业同业并购式全产业链...

  14. 十二层带中心支撑钢结构...

  15. 电站锅炉暖风器设计任务书

  16. 大众媒体对公共政策制定的影响

  17. 杂拟谷盗体内共生菌沃尔...

　　

About

751论文网手机版...

主页：http://www.751com.cn

关闭返回