显保护作用[16]。
(2)对肾损伤的保护作用:丹参提取物对急性肾功能衰竭(ARF)有很好的防治作用[16]。
(3)丹参酮l、丹参酮ⅡA、隐丹参酮有抗过敏作用;丹参对增生性瘢痕组织成纤维细胞生长具有明显抑制作用,有望为瘢痕的治疗开辟新的方法,最近日本还报道丹参酮类作为逆转录酶抑制剂来治疗艾滋病及逆转录病毒感染[16]。
1.4 响应面优化法
响应面优化法,即响应曲面法( Response Surface Methodology ,RSM),这是一种实验条件寻优的方法,适宜于解决非线性数据处理的相关问题。它囊括了试验设计、 建模、检验模型的合适性、寻求最佳组合条件等众多试验和计技术;通过对过程的回归拟合和响应曲面、等高线的绘制、可方便地求出相应于各因素水平的响应值。在各因素水平的响应值的基础上,可以找出预测的响应最优值以及相应的实验条件。响应面优化法,考虑了试验随机误差;同时,响应面法将复杂的未知的函数关系在小区域内用简单的一次或二次多项式模型来拟合,计算比较简便,是解决实际问题的有效手段。所获得的预测模型是连续的,与正交实验相比,其优势是:在实验条件寻优过程中,可以连续的对实验的各个水平进行分析,而正交实验只能对一个个孤立的实验点进行分析。
2 实验内容
本次实验包括6部分:丹参的提取方法选择,抗氧化活性测定,HPLC优化,方法学考擦,响应面优化实验和预测实验。
2.1 丹参中隐丹参酮和丹参酮ⅡA提取方法的选择
目前,从丹参中提取隐丹参酮和丹参酮ⅡA的主要的方法有超声辅助提取法、传统溶剂法、超临界流体萃取法等。
超声提取法:利用超声的机械效应、热效应和空化作用产生高能量、高温、瞬间高压力使细胞内的有效物质扩散、释放、和溶解的速度加快,可以有效的提高提取效率。
超临界流体萃取技术是利用超临界流体气体和液体二元性的特点,可以连续变化随系统压力和温度可以方便调整组件的溶解度和选择性溶剂提取有效成分的固体或液体,从而提高溶解能力组件和可分离的技术。虽然超临界流体过程简单,提取效率高,无剩余,没有环境污染。但超临界流体萃取法的操作压力大,能耗大,投资大。
传统溶剂法就是采用浸渍、冷渍的方法用溶剂溶解固体或液体中所含的某些有效成份。传统溶剂法虽然操作简单、经济,但是耗时大,相比超声辅助提取和超临界流体萃取法提取效率较差[17]。
综合考虑,采用超声辅助提取方法提取丹参中的隐丹参酮和丹参酮ⅡA。
目前有关于丹参中隐丹参酮和丹参酮ⅡA的提取工艺已有很多的报道;但是,尚未有关于采用响应面法优化丹参中隐丹参酮和丹参酮ⅡA的提取工艺。传统的正交实验设计和数据分析往往很难对多因素过程做详细的分析,一方面是需要的实验样本数过大,另一方面则是无法对各因素的相对重要性以及多因素关联作用做出进一步的分析,响应面优化法是在隐丹参酮和丹参酮ⅡA提取工艺影响因素相同的情况下,实验数比中心组合设计和正交设计更少、更经济,广泛用于中药的提取、分析检测。
2.2 丹参脂溶性提取物抗氧化活性测定来`自^751论*文-网www.751com.cn
2.2.1 实验部分
A 仪器与试剂
710紫外可见分光光度计,上海科学仪器有限公司;
1,1一二苯基. 2.苦肼基(DPPH),96%,上海晶纯试剂有限公司;