UG面向仿生微通道的家蚕丝腺数字化模型研究(3)

菜单

前部丝腺连接与吐丝管，是丝腺最细部分，且管径前后略同，腺体大致呈直线状。前部丝腺是丝物质流经的通道，并具有使丝物质纤维化的作用。中部丝腺连接前部丝腺后端，是整个丝腺最粗的地方，具有分泌丝胶的作用。后部丝腺是丝腺中最长的部分，其管径大体相同，具有分泌丝素的功能。

因为丝腺的前、中、后部结构比较简单，为变截面管道，肉眼可见，轴向尺寸可由常规测量手段得到，径向尺寸可由在显微镜下通过CCD拍摄到的图像用在同一放大倍数下标尺的拍摄图像处理后测量得到。而吐丝管处于头部下颚处，被头囊包裹着，常用的CT扫描技术精度低，不适合处于微米量级的吐丝管。切片技术是常见的观察细胞组织的手段，制作工艺成熟，且实验条件不高。制作好的切片可以在显微镜下方便清晰地观察到微小的组织结构。因此我们选择切片技术来观测头囊内吐丝管的结构。

2.2 家蚕丝腺吐丝管切片制作

实验对象:本文实验对象是五龄第五天的家蚕，由中国农业科学院蚕业研究所提供。

切片制作过程:

1、取材及固定

沿头囊根部切下头囊，放入3%的甲醛溶液中固定24小时，再将固定过的头囊在磷酸盐缓冲液中冲洗两次，每次10分钟，再依次放入一系列酒精（含量从30%-100%间隔10%递增）中脱水，每步10分钟。

2、渗透包埋

将头囊放置在切片盘中摆放整齐，每个切片盘放入四个头囊，浸入溶蜡箱，取出切片盘，调整头囊在浸泡过程中引起的位移，在冷冻台上快速冷却。

3、切片

切去组织周围过多的石蜡，一般留下约2mm宽度的蜡边为宜。将已经包埋好的切片盘装夹在石蜡切片机上，调整切片盘与刀至合适位置，将切片间距调至5um。连续旋转切出蜡带，用毛笔粘住石蜡切片放入水中。捞出切片平整的置于载波片上。

4、染色和封固

为了能很好的观察组织内部的细微结构，必须应用一些与固定后原生质有亲和性的染料源Z自+751/文%论,文]网[www.751com.cn，对其组织进行染色。将载波片放入烘干机中烘干，再放入二甲苯的染缸中脱脂，将载波片依次放入一系列酒精（酒精含量从100%-50%间隔10%递减）中醇化，每一步3-5分钟，再用蒸馏水洗2-5分钟，苏木精—伊红染色10-20分钟，接着依次放入一系列酒精（酒精含量从30%-100%间隔10%递增）中脱水，再放入二甲苯溶液中透明。取出后，待载波片上水分蒸发，在切片上滴入少量树胶，轻轻以盖玻片的一边接近载波片，迅速放下盖玻片，树胶很快扩张到四周。自然风干后，在盖波片的左端编号。