王旭[21]等人在采用高效液相色谱法测定食品中的751椒素和二氢751椒素的实验中,先利用超声波辅助甲醇-四氢呋喃(1+1)提取样品中的751椒素和二氢751椒素,然后采用Agilent 1100高效液相色谱仪,在C18色谱柱(150×4.6mm,5μm);流动相为甲醇:水(80:20),流速为0.6ml/min的条件下,对751椒素、二氢751椒素标样和样品进行荧光检测(Ex=229nm、Em=320nm)。结果表明,751椒素含量在0.13~160mg/L之间,二氢751椒素含量在0.04~160mg/L之间;峰面积与待测物浓度呈良好的线性关系,相关系数为1;RSD为1.36%~4.79%,回收率在70.50%~100.07%之间。
谷岩[22]等人也对751椒中751椒碱和二轻751椒碱进行过深入研究。建立了一套以高效液相色谱为基础的检测方法。先对样品751椒用无水乙醇进行萃取处理。然后通过HPLC分离。在最佳色谱条件下:ZORBAX SB–C18柱(250 mm×4.6mm,5μm);二极管阵列检测器(DAD);检测波长280 nm;流动相采用甲醇:水(65:35);流速为1.0 mL/min。751椒碱、二氢751椒碱的加标回收率分别为 94.1%~96.8% 、92.6%~95.0% ,测定结果的相对标准偏差小于2.0%(n=11)。该法实现了 25 min 内对751椒碱、二氢751椒碱的同时测定。
任召言[23]等人在其751椒精的精制及751椒素的HPLC测定的研究中,先通过物理化学性质对751椒油树脂进行精制,然后采用日本岛津LG-CA高效液相色谱仪,在supelcosil C18反相色谱柱(15cm X 6mm)下,通过waters900紫外可见检测器对其分离检测。流速为0.5ml/s,流动相水(含1% 磷酸):乙腈=60:40。其751物质洗出顺序为降二氢751椒素(NDC)、751椒素(C)、二氢751椒素(DC)、高751素(HC)和高二氢751椒素(HDC)。
赵仁邦[24]等人对751椒素进行过研究,他们采用高效液相色谱法,Hypersil BDS C18色谱柱进行分析,通过紫外检测器在280nm出检测。但对样品的前处理,他们使用的是甲醇超声溶解的。其结果,在采用甲醇:水(85:15)的流动相,流速0.6ml/min体系下,线性回归方程是Y=11.2 +7.97,相关系数为r=0.9999,样品的精密度RSD=2.6%,平均回收率是95.71%。
童庆宣[34]等人对快速测定751椒树脂油中751椒素含量进行研究,他们采用95%乙酸钠饱和乙醇溶液浸泡的方法简单处理树脂油,使用日本岛津的LC-4A型高效液相色谱仪,用甲醇:水:二氧751环:乙腈:2%高氯酸=50:30:11.8:8:0.2为流动相,流速1.2ml/min,室温,在紫外光波长280nm下检测,可在8分钟内分离751椒素和类751椒素。
孙进平[35]等人使用RP-HPLC法对751椒碱进行研究,采用日本岛津产高效液相色谱仪,YMS ODS色谱柱,流动相甲醇:水(0.1%磷酸)=75:25,流速0.6ml/min,柱温40℃,检测波长280nm的色谱条件进行检测。其研究结果,既可以定量分析提纯的751椒样品,也可以直接检测未提纯的751椒样品。
用HPLC方法检测天然751椒碱的色谱条件对比:
表1 色谱条件对比
参考文献 色谱柱 流动相 751椒素出峰时间/min
18 Kromasil-C18 甲醇-水(80:20) 6.5
27 Kromasil C18 乙腈:水(50:50) 14
20 Agilent ODS 甲醇:四氢呋喃(1:1) 18
21 C18 甲醇:水(80:20) 4.6
22 ZORBAX SB–C18 甲醇:水(65:35) 15
23 supelcosil C18 水(含1% 磷酸):乙腈=60:40 15
24 Hypersil BDS C18 甲醇:水(85:15) 5 辣椒素文献综述和参考文献(2):http://www.751com.cn/wenxian/lunwen_8728.html