(1)叶面积测定
将叶片平放于感应式叶面积测定仪上,固定好,用感应器从上而下缓慢滑动,完毕读取数据并记录,每组得到6个数值
(2)比叶重的测定
每组叶片叶面积测定完后,将叶片放在天平中测得鲜重并记录,然后将叶片放于牛皮纸袋中封好,待所有叶片鲜重测定完毕装入纸袋中后,将所有的纸袋叶片放于烘箱中,调整烘箱温度至80摄氏度,待得第二天取出,测得所有叶片的干重并记录,通过计算得到叶片的含水量和比叶重,比叶重即叶片干重除以叶面积(g/m2),即单位面积的叶干重。
2.4.3 栎子青冈叶片的叶绿素含量测定
(1)叶片平均叶绿素含量的测定
利用SPD502-便携式叶绿素计进行测定,分别在A\B\C三组容器苗中,选取生长状况良好的叶片进行测定,每株植株测定6个点,得到6个数据,利用叶绿素计取得平均值,即为每株苗的叶片平均叶绿素含量,这样每组获得6组平均值,记录。
(2)叶绿素含量测定
①从每组容器苗中分别取下6片叶子,放于塑料袋中并标记好,带回实验室
②把每片叶子用剪刀去掉中脉,剪取叶片0.1-0.2g,记好样品重
③将称取的样品放于研钵中,加入少量的石英砂,并加入3ml左右的95%的乙醇进行研磨
④样品研磨完全后,加15ml乙醇过滤于容量瓶中,再用相同的乙醇冲洗定容至25ml,放于暗处
⑤将定容好的样品溶液放于分光光度计中,分别在波长为663和645的条件下测得吸光度,即可算得叶绿素a\b的含量
叶绿素a=(12.7D663-2.69D645)*(V/W);叶绿素b=(22.9D645-4.63D663)*(V/W)
V—最终溶液体积;W—叶片重
2.4.4 栎子青冈叶片光响应曲线测定
此次实验利用叶绿素荧光仪测得,利用其中的PamWin_3软件获得参数和曲线主要测定方法参照叶绿素荧光仪的使用方法。先将电脑与荧光仪连接好,从每组容器苗中选取6盆植株,将叶绿素荧光仪的光纤连接在栎子青冈的叶片上,所选的叶片生长状况要良好,然后开始进行测定。待得一起测定好后,给数据命名并保存。每个叶片测得一条曲线,共11个点,得到相应的曲线参数。
以内置卤素灯为光源,设 17 个光强梯度,光合有效辐射分别为 0,5,15,50,125,225,400,600,1 000和1 400μmol•m-2•s-1,每个梯度持续 10 s,测量 ETR 值,然后绘制 ETR 对光强的响应曲线,即快速光曲线。每组重复测定6棵植株,结果取平均值。
测量光响应曲线时<Light Curve>程序连续照射几个强度逐渐升高的光化光,一般情况下每个梯度的光化光持续时间太短而不足以使光合作用达到稳态。因此,此时的光响应曲线被称为快速光曲线(RLC)。和传统的光响应曲线不同,快速光曲线反映了当前状态下光合作用的信息。通过对快速光曲线进行拟合,可以得到以下几个主要参数:
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