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    1.5 银杏黄酮的应用

    据报道,全球各种银杏制剂加上数目众多的银杏保健食品与含银杏提取物成分的化妆品等,在世界市场总销售额已超过50亿美元[11]。在生产实践中银杏黄酮的应用已经非常广泛,主要有以下几个方向:食品添加剂方向,向食品或饮料中添加银杏黄酮,生产保健食品和具有保健功能的饮料。药用方向,银杏黄酮可降低血脂和胆固醇含量,已研发出含银杏黄酮的减肥和治疗心血管疾病的药物。化妆品工业方向,银杏黄酮清除自由基的功效,可以防止脂质过氧化。向化妆品中添加银杏黄酮可以起到保护皮肤、抗衰老的作用[12]。

    1.6生物转化的反应类型

    生物转化是创制新药新分子的重要手段,用生物转化技术生产药物成为当今生物技术研究的热点课题。将其用于复杂天然药物的筛选和研制,是形成具有自主知识产权、发掘新的天然高效活性先导化合物的重要途径[13]。生物转化主要有以下几种反应类型:去糖基化反应,由于糖的种类、数量、连接位置及连接方式的不同,可以组成各种各样的黄酮苷。生物转化去糖基选择性强、反应稳定、产物易于分离[14]。羟基化反应,非活泼性碳氢键的羟基化是很重要的生物转化反应,使用传统的化学方法无法完成这样的羟基化反应,然而羟基化在生物转化中很常见。黄酮类化合物属于酚类抗氧化剂,研究发现含有邻-酚羟基的黄酮化合物清除自由基活性较强,含有邻-酚羟基的异黄酮表现出较强的抗炎抗过敏的活性。糖苷化反应,糖苷化反应可以获得新的高活性以及低毒性衍生物。可以改变化合物的溶解性,这是化学合成很难做到的。甲基化反应,甲基化黄酮类化合物在自然界中是很常见的衍生化手段,生物体通常采用甲基转移酶,以含有酚羟基作为底物进行甲氧基的衍生化反应。甲氧基化反应不仅能改变黄酮化合物的亲脂性,还能增强其抗菌作用[15]。

    1.7 本课题的发展前景

    近年来,国人对自身的健康越发重视,我国保健品市场也逐渐活跃起来。因此学者们对银杏叶的研究逐渐加深,人们的认识到了它的经济价值,这一点从近些年来关于银杏叶文献数量的增多可以看出来。银杏黄酮的研究成果在不同程度上得到应用,食品及医药行业中已经有许多应用的实例。现代关于银杏黄酮的研究,大多是面向对人类有力的方面,而银杏黄酮对人类的潜在危害却被忽视了。因此,今后的研究应该注意到银杏叶黄酮可能对人体有害的方面至今银杏叶的研究,完善对银杏黄酮副作用的研究。

    1.8 论文设计思路

    银杏叶中富含黄酮类物质,可作为心血管药物的原料,生物转化有可能会提升银杏黄酮的活性。本课题以银杏叶为原料,通过固体和液体发酵的方式进行生物转化,考察转化产物中是否有新产物的生成,并检测转化产物的体外活性。

     

    2.材料与方法

    2.1实验材料

    2.1.1菌种

    菌株:裂褶菌(Schizophyllum,编号DS1)[16],乳白耙菌(Irpex lacteus,编号CD3),灵芝(Ganoderma lucidum)。以上菌株由邬建国实验室保存。

    2.1.2原料与试剂

    原料:银杏叶片,采自于淮阴师范学院教工食堂后银杏树。(银杏叶片烘干至恒重,粉碎,过80目筛。)

    试剂名称 来源

    无水乙醇 江苏强盛功能化学股份有限公司

    甲醇 南京化学试剂有限公司

    三氯化铝 天津市大茂化学试剂厂

    硫酸亚铁

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