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表3.1.8反应时间与吸光度测定结果
时间/min 10 20 30 40 60
吸光度 1.398 1.408 1.428 1.398 1.318
图3.1.8 反应时间与吸光度关系曲线
由图可见，随着时间的推移，一开始溶液颜色较浅反应尚未完全，在20min~40min反应完全溶液颜色最深，40min后溶液颜色迅速褪去逐渐由蓝色变为绿色。由此本实验选定测定时间为20min。
由此看出溶液稳定性极差，不适于长期保存作为标准对比液。
因此，需要寻找与标准溶液颜色近似的稳定溶液作为标准对比液。通过不断实验比较，发现指示剂1为最佳选择。指示剂1在溶液呈碱性时的蓝色与标准溶液的蓝色极其相近。所以选定指示剂1溶液为模拟试剂1。
3.1.9 模拟试剂1吸光度与溶液PH的关系
移取1.0mL指示剂1，加入20mL蒸馏水，滴加0.025 mol•L-1NaOH调节PH，最后用蒸馏水定容至50mL容量瓶。以蒸馏水为参比在626nm波长下测定吸光度A，实验数据如表3.1.9，图3.1.9所示。
表3.1.9 指示剂1 PH与吸光度的关系
PH 6.80 7.10 8.48 9.45 10.11
A 0.345 0.422 0.444 0.446 0.447
图3.1.9指示剂1 PH与吸光度的关系
由图可见在PH在8附近吸光度达到最大值，随着PH的继续增大吸光度基本保持不变，PH的继续增大对吸光度的变化甚微，说明当指示剂1呈碱性时溶液颜色很稳定，即滴加1滴0.025 mol•L-1NaOH即可达到所需颜色。
3.1.10 模拟试剂1吸收光谱曲线
移取2.0mL指示剂1至50mL容量瓶，滴加一滴0.025 mol•L-1NaOH，加蒸馏水稀释至标线。测定此溶液吸光度，以蒸馏水为参比，波长在600~640nm范围内每隔10nm测一次吸收光值，620~630nm附近间隔2nm测一次吸收光值。吸光度（A）与入射光波长（λ）关系数据如表3.1.10，图3.1.10所示。
表3.1.10 模拟试剂1入射光波长与吸光度测定结果
λ/nm 600 610 620 622 624 626 628 630 640
A 0.642 0.736 0.810 0.816 0.821 0.822 0.821 0.813 0.723
图3.1.10 模拟试剂1入射光波长与吸光度关系曲线
由图可见指示剂1的最大吸收波长为626nm，与标准溶液的646nm最大吸收波长近似。
3.1.11 时间对模拟试剂1的影响及稳定性
移取2.0mL指示剂1至50mL容量瓶，滴加一滴0.025 mol•L-1NaOH，加蒸馏水稀释至标线。以蒸馏水为参比在626nm波长下测定吸光度A，实验数据如表3.1.11，图3.1.11所示。
表3.1.11 模拟试剂1时间与吸光度测定结果
时间/天 1 2 3 6 7
吸光度 0.842 0.841 0.844 0.845 0.846
图3.1.11 模拟试剂1时间与吸光度的关系曲线
由图可知，模拟试剂1其稳定，适合长时间保存不褪色。
3.1.12 标准工作曲线的建立
（1）取5个25mL容量瓶，分别加入氰化钾标准使用液1.00mL，2.50mL，5.00mL，7.50mL，10.00mL，加适量蒸馏水至10mL。
（2）向各管中加入7mL磷酸盐缓冲溶液，摇匀。迅速加入0.3mL氯胺T，立即盖紧塞子，摇匀，放置3~5min。