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（3）向各管中加入异烟酸—吡唑啉酮混合液5mL，摇匀，加蒸馏水稀释至刻度。在40℃的条件下（可用水浴控制），放置20min。
（4）在分光光度计上于646nm和626nm波长处分别测定，用蒸馏水作参比，用1cm比色皿进行测定，记录吸光度并作标准曲线。实验数据如表3.1.12，图3.1.12所示。
表3.1.12 氰化钾标准溶液浓度与吸光度测定结果
C/ μg•mL-1 0.04 0.1 0.2 0.3 0.4
A(626nm) 0.095 0.244 0.507 0.783 1.042
A(646nm) 0.128 0.331 0.691 1.057 1.399
图3.1.12 氰标准工作曲线
图中在646nm波长处得到氰标准线性方程：y = 3.5538x - 0.018，其R2 = 0.9999。
图中在626nm波长处得到氰标准线性方程：y = 2.647x - 0.0164，其R2 = 0.9998。
由图可知，标准溶液分别在626nm和646nm下测得的吸光度线性都很不错，本文要寻找的模拟试剂1的最大吸收波长为626nm，而标准溶液在626nm波长处绘制的标准工作曲线依旧呈线性，即论证了用模拟试剂1代替标准溶液的可行性。
3.1.13 配制相应的模拟试剂1代替标准溶液系列
取5个50mL容量瓶，分别加入指示剂1溶液0.20mL，0.55mL，1.20mL，1.85mL，2.55mL，滴加1滴0.025 mol•L-1NaOH，加蒸馏水稀释至刻度。在分光光度计上于626nm波长处分别测定，用蒸馏水作参比，用1cm比色皿进行测定，记录吸光度并作标准曲线。
实验数据如表3.1.13，图3.1.13所示：
表3.1.13 模拟试剂1体积与吸光度的关系
V/mL 0.20 0.55 1.20 1.85 2.55
A 0.094 0.240 0.505 0.784 1.042
图3.1.13 模拟试剂1体积与吸光度的关系
图中模拟试剂1体积与吸光度的关系线性方程：y = 0.4062x + 0.0171，其中中R2 = 0.9994。
由图可知，指示剂1系列溶液线性较好，作为标准溶液的代替液较为理想。
3.1.14 模拟试剂1在长时间内的稳定性试验
将上述3.1.13中的模拟试剂1系类保存数周至数月，在波长626nm出测定吸光度A，观察期稳定性。结果如表3.1.14所示。
吸光度
序号
时间（周）
1 2 3 4 5
1 0.094 0.240 0.505 0.784 1.042
2 0.091 0.242 0.518 0.794 1.076
3 0.090 0.245 0.520 0.799 1.087
4 0.088 0.245 0.525 0.801 1.094
5 0.095 0.240 0.540 0.836 1.096
7 0.096 0.249 0.554 0.855 1.133
8 0.101 0.253 0.556 0.859 1.132
10 0.105 0.257 0.558 0.867 1.138
14 0.100 0.252 0.517 0.886 1.158
19 0.098 0.251 0.562 0.878 1.144