- 上一篇：中温化学镀Ni-P合金工艺研究+文献综述
- 下一篇：2.5万吨/年液相氧化甲苯制苯甲醛工艺设计
2.5.4预先进行干扰实验
药典中或有国家标准或其他内毒素检验标准中已有规定的品种，可直接进行内毒素检查，如在检验中出现干扰的情况，需再进行干扰实验的验证。其他未建立内毒素检查的品种需先进行干扰实验，确定不干扰浓度后再进行内毒素检查。
2.5.5实验准备
（1）玻璃器皿的洗涤。
将玻璃器皿放入铬酸洗液或其他热原灭活剂或清洗液中充分浸泡，然后取出将洗液空干，用自来水将残留洗液彻底洗净，再用蒸馏水反复冲洗三遍以上，空干后放入适宜的密闭金属容器中或用锡箔纸包好后再放入金属容器内，放置入烤箱。
（2）除去玻璃器皿表面可能存在的外源性内毒素。
玻璃器皿置烤箱后，将烤箱调至250℃，待烤箱温度升至设定的温度后开始计时，干烤至少1小时。达到规定时间后，关断电源，待烤箱温度自然降至室温。在不打开包装的情况下，可在两天内使用；如果玻璃器皿用锡箔纸包装，在不打开包装的情况下可在两周内使用，否则再次干烤除去可能存在的外源性内毒素。
（3）某些供试品需进行复溶、稀释或在水性溶液中浸提制成供试品溶液。
一般要求供试品溶液的PH值在6.0～8.0的范围内。对于过酸、过碱或本身有缓冲能力的供试品，需调节被测溶液（或其稀释液）的PH值，可使用酸、碱溶液或适宜的缓冲液调节PH值。酸或碱溶液须用细菌内毒素检查用水在已去除内毒素的容器中配制。缓冲液必须经过验证不含内毒素和干扰因子。
2.5.6细菌内毒素检测方法---凝胶法操作方法
凝胶法系通过鲎试剂与内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素的方法。
(1)鲎试剂灵敏度复核
在本检查法规定的条件下，使鲎试剂产生凝集的内毒素的最低浓度即为鲎试剂的标示灵敏度，用EU/ml表示。当使用新批号的鲎试剂或试验条件发生了任何可能影响检验结果的改变时，应进行鲎试剂灵敏度复核试验。
(2)实验操作
a.细菌内毒素标准溶液的制备
取细菌内毒素国家标准品或工作标准品一支，轻弹瓶壁，使粉末落入瓶底，然后用砂轮在瓶颈上部轻轻划痕，75%酒精棉球擦拭后启开，开启过程中应防止玻璃屑落入瓶内。
根据鲎试剂灵敏度的标示值(λ),将细菌内毒素国家标准品或细菌内毒素工作标准品用细菌内毒素检查用水溶解，在旋涡混合器上混合15分钟，然后制成λ、0.5λ的内毒素标准溶液，每稀释一步均应在旋涡混合器上混匀30秒钟（详细过程参见标准品使用说明书）。
b.待复核鲎试剂的准备
取分装有0.1ml鲎试剂溶液的10mm×75mm试管或复溶后的0.1ml/支规格的鲎试剂原安瓿10支，其中2管分别加入0.1ml内毒素标准溶液为阳性对照，；另外2管加入0.1ml细菌内毒素检查用水作为阴性对照。另6管分别加入0.1ml的水样。然后在各管中再分别加入0.1ml细菌内毒素检查用水。将试管中溶液轻轻混匀后，封闭管口，垂直放入37℃±1℃的恒温器中，保温60分钟±2分钟。
c.观察并记录结果。
将试管从恒温器(或水浴)中轻轻取出，避免振动，缓缓倒转180°，若管内形成凝胶，并且凝胶不变形、不从管壁滑脱者为阳性，记录为（＋）；未形成凝胶或形成的凝胶不坚实、变形并从管壁滑脱者为阴性,记录为（－）。保温和拿取试管过程应避免受到振动造成假阴性结果。
3.结果与讨论
3.1纯化水标准检测结果
表3.1 纯水标准检测结果
检测项目 检测结果
性状 无色无的澄明液体
酸碱度 酸碱度合格