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1.2.2 黑木耳多糖的提取分离
(1)提取方法
提取按提取溶剂的不同分为热水浸提法、酸提法、碱提法、有机溶剂提取法、双酶提取法、复合酶提取法，其中较常用的是水提法和碱提法。多糖由于其易溶于水，不溶于乙醇的性质而常用水做提取溶剂，即所谓的相似相容原理。一般工艺是原料经水提、离心、醇沉、干燥得粗多糖。这是目前最为常用的方法。
热水浸提法是多糖提取的传统方法，用水作为溶剂浸取多糖，在恒温水浴上回流浸提，过滤后得滤液和滤渣。滤渣反复浸取几次合并滤液，经浓缩、乙醇醇沉、离心，干燥即得到粗多糖。
酸浸提法的浸提过程是在酸性条件下完成的，向原料中加一定量酸性溶液，然后在恒温水浴中浸提一定时间，用碱中和后过滤，滤渣用酸液反复浸提几次，最后合并滤液，浓缩、醇沉、分离、洗涤脱水、干燥得粗多糖。
碱浸提法是向原料中加一定量的碱溶液，然后在恒温水浴中浸提一定时间，用酸中和后过滤，滤渣用碱液反复浸提几次，最后合并滤液，浓缩、用乙醇沉淀、分离、洗涤脱水、干燥即得粗多糖[12]。
酸浸提法和碱浸提法虽然也可以提高多糖得率，缩短提取时闻，但由于酸、碱在浓度因子难以控制的情况下，容易使部分多糖发生水解，从而破坏多糖的活性结构，降低多糖得率。而且酸提取法会对容器造成腐蚀，除弱酸外，一般不宜采用；碱法提取后的溶液粘度大，过滤困难。
酶法从原理上不同于前面三种方法，该法是向溶液中加入一定量的酶制剂，然后再从溶液中浸提多糖。将原料和水按一定比例配成溶液，调整适当的pH值，加入酶制剂，置于恒温水浴中酶解一定时间，然后过滤、浓缩、醇沉、离心、洗涤脱水，干燥即得粗多糖。相对于酸碱浸提法及热水浸提法，采用酶法提取多糖具有条件温和、杂质易除和提高得率等优点。酶法浸提全程分为酶促反应和高温浸提两个阶段。第一阶段主要作用是酶解细胞表面结构及胞间连接物，并伴有少量多糖溶出。第二阶段通过提高温度后，既具有灭酶作用，同时使可溶于热水的胞内多糖溶出率增加。在酶法工艺中两个阶段同样重要[24]。微波辅助法微波提取是利用微波的穿透性能够透入基质内部形成热源，利用其加热的选择性，能够使细胞内各细胞器升压，细胞壁破裂，使目标成分从细胞中释放出来并溶解于溶剂中，近年来微波技术开始应用于中草药有效成分的提取[16]。
微波能促进反应的高效性和强选择性，具有操作方便、省时、节能等特点，提取含量相对较高，同时微波辅助提取法所得到的产品副产品少，易提纯，微波加热还易使植物细胞壁破裂，能有效提高提取率。微波功率大，萃取温度高，导致多糖浸提速度加快，提取率增加，但温度过高会影响多糖的活性。利用微波法可以有效地提高多糖的提取率，但微波辅助萃取是否影响多糖的生理活性，有待进一步研究，而且这种方法目前尚属于实验室阶段，不能用到工业生产中。
超声波法提取多糖的得率较高，超声波法是应用超声波来强化提取多糖，通过空化、振荡等作用，促进细胞周围形成微流，从而提高细胞膜及细胞壁的通透性，是一种物理破碎过程。超声波师频率高于20kHz的机械波，它在媒质中传播时可产生空穴作用，空穴中产生的极大压力造成被破碎无在瞬间破碎，同时超声波产生的振动作用加强了破碎物的扩散及溶解。因此，在提取细胞内物质的过程中科用超声波进行细胞壁破壁，从而达到充分释放多糖，提高多糖提取量的作用。目前超声波提取法在中草药化学成分提取中应用比较多，在天麻、大黄等中草药有效成分的提取中均有报道。超声波提取法具有时间短、效率高等特点，该法较热水提取法简便，因此超声波法仍是值得推广的一种提取方法[19]。
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