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    1.2 主要仪器

    冷冻离心机 美国贝克曼公司；雪花制冰机 日本三洋公司；MDF-328超低温冰箱 日本三洋科研医疗设备厂；凝胶成像系统 美国BIO-RAD公司；电泳仪 美国Bio-RAD公司；高压灭菌锅 日本三洋公司；Galanz WD700型微波炉 佛山市顺德区格兰仕电器有限公司；DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱 上海精宏实验设备有限公司；TD5A-WS台式低速离心机 长沙湘仪仪器有限公司；电子分析天平 Sartorius公司；超净工作台 苏州净化；移液器 德国Eppendorf；涡旋振荡器 太仓市科教器材厂。

    1.3试验方法

    1.3.1 RNA提取

    （1）收集人的胚肾细胞，PBS洗两次后，加入1mL Trizol试剂，振荡器震荡。

    （2）室温放置5min，加入氯仿200ul/mL Trizol。

    （3）剧烈震荡15sec，室温放置3min。

    （4）12000g，4℃，15min，取上清液至新EP管中。

    （5）加入等体积异丙醇（约500ul/mLTrizol），沉淀RNA，涡旋振荡，静置10min（室温）。

    （6）12000g，4℃，离心，10min。

    （7）吸去上清液，加入75％乙醇（DEPC水稀释，预冷）1mL，振荡。

    （8）7500g，4℃，5min。

    （9）弃上清液，风干5-10min（超净台）。

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