1 材料与方法
1.1 试验材料
徐薯22及萌发茎蔓
1.2 试验方法
1.2.1 实验仪器及药品试剂
电子天平,酸度计,烧杯,50 ml量筒,1 L量筒,7 ml离心管,海绵,超纯水,1/8霍格兰营养液,褪黑激素,褪黑激素合成抑制剂(P-氯苯丙氨酸)
1.2.2甘薯幼苗的培养
挑选大小合适、形态健康的济薯22共5个,清水洗净,并喷施0.1 %多菌灵溶液,静置2小时后洗净,种植于含有泥炭,珍珠岩和原土的混合土壤环境中。通过适当浇水保持土壤湿润,并放置于28 ℃/26 ℃的温室中静置1月萌发茎蔓。
1.2.3试剂的配制
配置含有不同浓度的褪黑激素/褪黑激素合成抑制剂的处理液(用1/8霍格兰营养液配置),用7 ml离心管分装后得到以下处理组:对照为1/8霍格兰营养液,褪黑激素浓度为0.05 μM、0.1 μM、0.5 μM、5 μM、 10 μM、100 μM, 褪黑激素合成抑制剂(P-氯苯丙氨酸)浓度为10μM,共8组处理,每组需要8个重复,共需要64株徐薯22苗。
1.2.4试验插条处理
挑选长势一致的徐薯22苗,从茎一定部位剪下,保证剪取部分大体一致,将其作为试验插条。
将试验插条插入配置好的处理液中,保证插入处理液中茎的长度一致,不超过一厘米。离心管用锡箔纸包裹避光,甘薯苗用海绵固定。实验过程中每天统计完不定根数据之后需要更换处理液,避免褪黑激素/褪黑激素合成抑制剂降解对实验准确性产生影响。
1.2.5数据采集
从甘薯茎基部插入处理液起每24小时拍照,并且测定每株甘薯茎基部不定根数目和每株甘薯茎基部不定根的平均长度。每株甘薯苗平均不定根长度统计方式为:一株甘薯苗茎基部不定根总长度/不定根数目。不定根数目统计以肉眼可见不定根为准。来!自~751论-文|网www.751com.cn
2 结果与分析
2.1 不同浓度外源褪黑激素对甘薯不定根数量的影响
图2-1 不同浓度褪黑激素处理下产生的不定根数量
Fig.2-1 The number of adventitious roots under different concentration of melatonin treatment
为了研究不同浓度的外源褪黑激素对甘薯不定根数量的影响,配置 0.05 μM、0.1 μM、0.5 μM、5 μM、 10 μM、100 μM的褪黑激素以及1/8霍格兰营养液来处理甘薯苗。从图2-1中看出,当用0.05 μM的外源褪黑激素处理甘薯苗,与对照组相比,前四天所产生的不定根数量略少于对照组,第五天、第六天产生的不定根数量多于对照组,第七天、第八天所产生的不定根数量与对照组几乎持平;当用0.1 μM的外源褪黑激素处理甘薯苗,与对照组相比,八天以来所产生的不定根数量全部超过对照组,特别是第六天、第七天、第八天,这三天产生的不定根数量远远超于对照组所产生的不定根数量;当用0.5 μM的外源褪黑激素处理甘薯苗,与对照组相比,八天以来所产生的不定根数量全部超过对照组,但是没有0.1 μM处理组明显;当用5 μM的外源褪黑激素处理甘薯苗,与对照组相比,八天以来所产生的不定根数量同样全部超过对照组,但是同样的也没有0.1 μM处理组明显;当用20 μM的外源褪黑激素处理甘薯苗,与对照组相比,前五天所产生的不定根数量少于对照组,特别是第一天、第二天、第三天,这三天产生的不定根数量远远少于对照组,但是自第六天起产生的不定根数量多于对照组;当用100 μM的外源褪黑激素处理甘薯苗,与对照组相比,前三天产生的不定根数量略多于对照组,第四天所产生不定根数量与对照组几乎持平,自第五天起所产生的不定根数量远远少于对照组,特别是第六天、第七天。