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    色谱柱 HP-INNOWAX(60m×0.25mm(i.d)×0.25μm(d.f))

    2.2.2 同时蒸馏萃取(SDE)前处理方法
    烟叶经去梗、干燥、粉碎(过40目筛),称取一定量的烟末和氯化钠放入500mL圆底烧瓶,同时加入250mL去离子水,接装在同时蒸馏萃取装置的一端,使用能调节温度的电炉对其进行加热,取60mL二氯甲烷加入100mL圆底烧瓶,接装在装置的另一端,该烧瓶置于水浴锅中加热,控制水浴温度,同时蒸馏萃取2.5h,萃取完成后在100mL的圆底烧瓶中加入适量的无水硫酸钠,干燥过夜。萃取液过0.45µm有机系微孔滤膜,将萃取液浓缩至1mL,加入20µL浓度为5.564mg/mL乙酸苯乙酯(内标)的二氯甲烷溶液,进行GC-MS分析。
    2.2.3 气相色谱-质谱(GC/MS)分离分析方法
    设定色谱升温程序如下:
                2℃/min           5℃/min
    60℃(2min)            180℃             230℃(40min)
    色谱柱:HP-INNOWAX(60m×0.25mm(i.d)×0.25μm(d.f))
    进样口:250℃              载气:氦气               载气流速:lmL/min
    检测器:300℃              进样量:lµL                溶剂延迟:3min
    四极杆温度:l50℃          EI离子源温度:230℃        电子能量:70eV
    质量范围:20-350amu         分流/不分流模式:不分流
    2.2.4 定性定量方法
    对发酵烟叶按照上述处理方法所得样品进行GC/MS分析,得到质谱全扫描信号总离子流图,对总离子流图用MYLIB标准图谱库和NIST05a标准图谱库谱进行串联检索定性分析,得到致香成分的定性结果。
    对发酵烟叶中致香成分的含量以相对于内标物的含量进行计算,假定其相对内标校正因子为1,计算公式如下:ms(µg/g)=(mi×As)/(Ai×mo);公式中的ms表示致香成分的含量(µg/g),mi表示所加内标物的量(µg),mo表示实验中所用烟末的质量(g),As表示致香成分的峰面积,Ai表示内标物的峰面积。
    2.2.5 加料香精的调配方法
    加料香精由调料、增香料、保润料、主燃料、防霉料构成。根据烟草的化学成分和理化性质添加糖料、有机酸,根据叶组配方和产品风格添加增香料,即各种香原料,一般香原料先用一定浓度的丙二醇或乙醇溶解均匀,再依次加入料液中。最后根据生产和销售季节添加防霉剂、助燃剂和保润剂。 
    2.2.6 表香香精的调配方法
    本实验采用分析手段,对烟草的发酵烟香进行定性定量的研究分析。具体方法可分为四个步骤:
    (1)通过仪器定性分析得到各组分;
    (2)定量分析组成,得到各组分的含量比例;
    (3)根据实际情况,初步拟定配方。

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